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實驗目的:本次實驗需要樣品蛋白純化,實驗要求需除去樣品中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度;故此次實驗室選用凈信科研者系列的冷凍真空冷凍離心濃縮儀JX-ZLN-B來對樣品組織進行低溫濃縮,以便在保護樣品的同時獲得優(yōu)質(zhì)的樣品效果。
實驗設備:冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)
樣品蛋白純化離心濃縮實驗操作過程:
1、在實驗開始前,我們需要提前將實驗所需的儀器設備,實驗耗材以及樣品組織等準備好
2、在實驗開始前,需對儀器設備所需的冷阱溫度-65℃進行設置,點擊儀器設備的制冷按鈕,對儀器設備進行提前預冷操作
3、在儀器設備的參數(shù)設置處,需按樣品的實驗要求對其依次進行程序參數(shù)的設置:速度、時間和溫度;選定實驗所需要的程序,點擊溫度設置開始提前加熱
4、待主機的預熱溫度和冷阱預冷溫度都達到所設置的程序參數(shù)后,即可將已經(jīng)配置好的10ml樣品放置在離心濃縮儀設備中進行配比;要注意管口為開口狀態(tài),點擊START開始運行
5、在儀器設備的運行過程中,可用頻閃儀對其溶液離心濃縮的情況進行觀察,可實時控制樣品實驗的進度
6、在儀器設備運行結(jié)束時,轉(zhuǎn)子停止運行后,蜂鳴器發(fā)出提示音后,此時便可取出離心管,獲取到所需濃縮后的樣品效果了
7、關閉冷阱,開始除霜回收冷阱中的溶劑。
樣品蛋白純化離心濃縮前后實驗效果圖:
冷凍真空離心濃縮儀對蛋白純化離心濃縮的實驗效果由上圖可看出,低溫純化離心濃縮樣品,可使樣品更安全。蛋白質(zhì)是包括人類在內(nèi)的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質(zhì)基礎之一;而研究蛋白質(zhì)首要的步驟是將目的蛋白從復雜的大分子混合物中分離純化出來,得到高純度具有生物學活性的目的物。因此,高效的純化技術(shù)和手段是蛋白質(zhì)研究的重要基礎和關鍵之一。
需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度。蛋白純化需要獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。冷凍真空離心濃縮儀采用離心力、真空和加熱相結(jié)合的方法使樣品中的溶劑快速蒸發(fā),從而達到濃縮樣品的目的。低溫濃縮,使樣品更安全。廣泛應用于蛋白和分子結(jié)構(gòu)實驗室。