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實(shí)驗(yàn)樣品:本次實(shí)驗(yàn)樣品為水稻葉片,為滿足樣品實(shí)驗(yàn)需求更好的提取樣品RNA,此次實(shí)驗(yàn)選用上海凈信的多樣品組織研磨儀來對(duì)其樣品組織進(jìn)行前處理實(shí)驗(yàn)研磨操作,以便后續(xù)對(duì)樣品RNA的提取。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:多樣品組織研磨儀Tissuelyser-192L
水稻葉樣品前處理的實(shí)驗(yàn)研磨操作步驟:
1.在實(shí)驗(yàn)開始前,需要提前準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)設(shè)備多樣品組織研磨儀一臺(tái),96深孔板2塊,5mm研磨珠以及水稻葉片樣品若干
2.需先對(duì)深孔板本以及適配器放入液氮終進(jìn)行冷凍預(yù)冷處理;對(duì)其葉片樣品進(jìn)行剪切,將其樣品剪切成小塊狀,以便更方便的將其樣品放置在深孔板內(nèi)
3.把剪切后的組織樣品裝入預(yù)冷處理后的深孔板內(nèi),再把預(yù)冷處理后的深孔板放入儀器設(shè)備內(nèi),旋緊螺帽
4.啟動(dòng)儀器,根據(jù)樣品的實(shí)驗(yàn)需求對(duì)其設(shè)備的程序參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)設(shè)置
5.啟動(dòng)儀器的運(yùn)行鍵,開啟儀器的程序運(yùn)行,開始對(duì)組織樣品的前處理實(shí)驗(yàn)研磨。
6.待儀器停止運(yùn)轉(zhuǎn)后,研磨結(jié)束,關(guān)閉電源,即可將深孔板從研磨倉內(nèi)取出,然后使用開蓋工具打開深孔板的蓋子,取出實(shí)驗(yàn)樣品即可。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1、按照樣品量來選擇研磨珠配比和參數(shù)設(shè)置,能夠滿足對(duì)樣品的前處理實(shí)驗(yàn)效果,有不清楚的及時(shí)問上海凈信銷售人員。
2、往適配器里放研磨管時(shí)注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線。
實(shí)驗(yàn)對(duì)比圖:水稻葉片樣本前處理實(shí)驗(yàn)研磨前后效果圖
本次實(shí)驗(yàn)通過使用多樣品組織研磨儀對(duì)水稻葉片樣品的前處理實(shí)驗(yàn)研磨,成功提取了樣品RNA。在實(shí)驗(yàn)操作過程中,我們深刻體會(huì)到了研磨儀設(shè)備在植物組織研磨和RNA提取方面的性能優(yōu)勢(shì)。裂解珠碰撞法不僅能夠在短時(shí)間內(nèi)快速高效地破碎植物細(xì)胞壁,還避免了傳統(tǒng)方法中的費(fèi)時(shí)費(fèi)力、效果差以及交叉污染等問題。
通過本次實(shí)驗(yàn),我們驗(yàn)證了該研磨儀在處理植物樣本、尤其是水稻葉片方面的有效性,并成功獲得了高質(zhì)量的RNA樣本。這為后續(xù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了有力的支持。同時(shí),我們也意識(shí)到在實(shí)驗(yàn)中合理設(shè)置研磨珠配比和參數(shù)的重要性,以及實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng),這將有助于我們更好地進(jìn)行類似實(shí)驗(yàn),提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。